今天研創(chuàng)生物小編和大家分享一下手性色譜柱的安裝步驟,讓我們一起來了解一下吧。
步驟1:檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管,檢查進(jìn)樣墊和氣體過濾器,確保輔助氣體和探測器的氣體暢通有效。如果以前做過沸點(diǎn)較高的化合物,則需要清洗或更換進(jìn)樣。
步驟2:在柱上安裝螺母和卡套,仔細(xì)將色譜柱兩端切平,在手性色譜柱一端安裝相應(yīng)的螺母和卡套。此時,手性色譜柱端口沒有前后之分,色譜柱支架的支撐部分應(yīng)始終朝向柱箱門。
安裝螺母和夾套后,將色譜柱端口切平,用放大鏡檢查,確認(rèn)切口與管壁成直角,無殘留碎屑,無毛刺或不均勻切割面。
步驟3:將手性色譜柱連接到進(jìn)樣口。一般來說,色譜柱的頂部應(yīng)保持在進(jìn)樣口襯管的中下部。當(dāng)進(jìn)樣針穿過墊片時,*插入進(jìn)樣口后,如果針尖與襯管中色譜柱頂部相差1-2cm,這是理想的狀態(tài)。
從手性色譜柱架上取出要連接的足夠長度,并按步驟2切割柱,連接到進(jìn)樣口。
避免用力彎曲和擠壓毛細(xì)柱,小心不要讓標(biāo)志和其他邊緣鋒利的物體與色譜柱接觸和摩擦,以防止柱體斷裂或損壞。
將手性色譜柱正確嵌入進(jìn)樣口后,用手?jǐn)Q緊連接螺母,用手?jǐn)Q緊,用扳手再擰1/4-1/2圈。
步驟4:連接載氣,載氣必須為高純氮?dú)猓ɑ蚝猓?,純度?9.999%。使用極性柱時(如FFAP、PEG-20M等),載氣加脫氧管進(jìn)一步脫氧,可延長柱子的使用壽命。
當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口連接時,將載氣連接起來。調(diào)整柱前的壓力,以獲得適當(dāng)?shù)妮d氣流速。將色譜柱的另一端(空端)插入裝有己烷的樣品瓶中。正常情況下,我們可以看到瓶中穩(wěn)定連續(xù)的氣泡。
如果沒有氣泡,需要重新檢查載氣裝置和流量控制器是否安裝或者設(shè)置正確,檢查整個氣路是否泄漏。所有問題解決后,從瓶中取出色譜柱端口,擦拭干凈,確保柱端口無溶劑殘留,然后進(jìn)行下一步安裝。
步驟5:將手性色譜柱連接到檢測器上,其安裝和注意事項與上述色譜柱與進(jìn)樣口連接(步驟3)大致相同。安裝時,注意色譜柱末端高于尾吹點(diǎn),或按色譜儀說明書安裝。
步驟6:氣體檢漏在色譜柱加熱前,要對氣體進(jìn)行檢漏GC系統(tǒng)檢漏。檢查建議使用1∶1異丙醇/水的混合溶液。
步驟7:色譜柱老化,色譜柱安裝及系統(tǒng)泄漏檢測完成后,色譜柱可進(jìn)行老化。將色譜柱程序加熱到使用溫度的30℃以下,恒溫30分鐘。這樣,柱內(nèi)吸附的成分就會被吹出,以免影響您的分析。
最后,將手性色譜柱的溫度降低到所需的溫度,進(jìn)行實(shí)際樣品分析。
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